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紫外分光光度計工作原理

更新時(shí)間:2013-07-11   點(diǎn)擊次數:3843次
  物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(cháng)的光能量,相應地發(fā)生了分子振動(dòng)能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會(huì )相同。因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線(xiàn),可根據吸收光譜上的某些特征波長(cháng)處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結構和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
  
  又因為許多物質(zhì)在紫外-可見(jiàn)光區有特征吸收峰,所以可用紫外分光光度法對這些物質(zhì)分別進(jìn)行測定(定量分析和定性分析)。 UV紫外光度計的紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律。http://img59.chem17.com/2/20130701/635083013912080846802.jpg
  
  朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)是光吸收的基本定律,俗稱(chēng)光吸收定律,是分光光度法定量分析的依據和基礎。當入射光波長(cháng)一定時(shí),溶液的吸光度A是吸光物質(zhì)的濃度C及吸收介質(zhì)厚度l(吸收光程)的函數。
  
  紫外分光光度法
  
  首先確定實(shí)驗條件,并在此條件下測得標準物質(zhì)的吸收峰以及其對應波長(cháng)值(同時(shí)可獲得該物質(zhì)的zui大吸收波長(cháng));再在選定的波長(cháng)范圍內(或zui大波長(cháng)值處),分別以(不同濃度)標準溶液的吸光度和溶液濃度為橫、縱坐標繪出化合物溶液的標準曲線(xiàn)得到其所對應的數學(xué)方程;接著(zhù)在相同實(shí)驗條件下配制待測溶液,測得待測溶液的吸光度,zui后用已獲得的標準曲線(xiàn)方程求出待測溶液中所需測定的化合物的含量。


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